检测ELISA试剂盒内在质量的两点方法
时间: 2020-02-26 09:32:14
检测ELISA试剂盒内在质量的方法:
利用干扰实验即可辨别ELISA试剂盒是否检测目的抗原
1.将针对试剂盒特异性的重组蛋白抗原和试剂盒中的检测抗体配置成antibody: antigen≈1:2的混合孵育液
2.37℃孵育15分钟后,代替原试剂盒
3.后续操作按照试剂盒说明书进行,加检测抗体、酶复合物和底物
4.实验完毕后,检测其标准曲线,如果标准曲线良好则说明加入的目的抗原和试剂盒抗体不匹配,ELISA试剂盒检测抗体针对的是非目的抗原,该试剂盒为伪劣假造试剂盒。
5.如果标准曲线无线性,则说明试剂盒检测抗体已被目的抗原中和或干扰,影响了其实际试剂盒抗体的检测作用,则该试剂盒检测抗体针对的是目的抗原。
第二、在同一公司购买两盒不同指标ELISA试剂盒的情况下,可用交叉实验即可辨别
1.取出购买的试剂盒A的包被板两条。
2.一条包被板加试剂盒A的标准品做标准曲线。
3.另一条包被板加试剂盒B的标准品做标准曲线。
4.后续操作按照试剂盒说明书进行,加检测抗体、酶复合物和底物。
5.实验完毕后,检测两条标准曲线,如果两条标准曲线一致则说明两个ELISA试剂盒检测的同一个指标而非A和B,即该试剂盒为伪劣假造试剂盒。
6.如果两条标准曲线不一致则说明两个试剂盒检测的不同指标,试剂盒A只能检测A,不能检测B,即该试剂盒为正常的ELISA试剂盒。