1.调理 pH 值
用pH试纸(或 pH 电位计、氢离子浓度比色计)测验培育基的pH值,如不契合需求,可用10%HCl或10%进行调理, 直到调理到配方要求的pH值停止。
2.分装
已过滤的 培育基 应进行分装。 如果要制造斜面培育基, 须将培育基分装于试管中。如果要制造平板培育基或液体、半固体培育基, 则须将培育基分装于锥形瓶内。
3.过滤
用滤纸、纱布或棉花趁热将已配好的培育基过滤。用纱布过滤时, zui好折叠成六层, 用滤纸过滤时, 可将滤纸折叠成瓦棱形, 铺在漏斗上过滤。
4.制造溶液
向容器内参加所需水量的一部分, 按照培育基的配方, 称取各种质料, 顺次参加使其溶解, zui终补足所需水分,对蛋白胨、肉膏等物质, 需加热溶解, 加热进程所蒸腾的水分, 应在悉数质料溶解后加水补足。
5.制造斜面培育基和平板培育基
培育基灭菌后, 如制造斜面培育基和平板培育基, 须趁培育基未凝结时进行。
6.加棉塞
分装结束后, 需求用棉塞堵住管口或瓶口。堵棉塞的首要意图是过滤空气, 防止污染. 棉塞应选用普通新鲜、干燥的棉花制造, 不要用脱脂棉, 防止因脱脂棉吸水使棉塞无法运用。制造棉塞时, 要根据棉塞巨细将棉花铺展成恰当厚度, 揪取手掌心巨细一块, 铺在左手拇指与食指圈成的圆孔中, 用右手食指插入棉花中部, 一起左手食指与姆指稍稍紧握, 就会形成 1 个长棒形的棉塞. 棉塞作成后, 应敏捷塞入管口或瓶口中, 棉塞应紧贴内壁不留缝隙, 以防空气中微生物沿皱折侵入。棉塞不要过紧过松, 塞好后, 以手提棉塞、管、瓶不下落为适宜。棉塞的 2/3 应在管内或瓶内, 上端露出少量棉花便于拔取。塞好棉塞的试管和锥形瓶应盖上厚纸用绳捆札, 准备灭菌。