今天提供一套小分文章的实验套路,基于纯细胞和分子生物学的药理学研究。
1、首先使用时间或是浓度梯度的药物处理细胞,这里的细胞有两种,一种是细胞系一种是原代细胞,这样减少永生化细胞对结果的影响。然后观察不同浓度和时间处理条件下的细胞活性,这里的活性检测可以使用台盼蓝拒染实验和LDH毒性试验。
2、随后,要使用CCK8排除细胞增殖对结果的影响,因为随着药物处理时间的延长,细胞数量必然会干扰试验结果,因此需要通过判断细胞的生长周期,来确认处理浓度和处理时间。
3、确认时间和浓度后,观察细胞的功能学改变,这里就需要涉及到研究的目的了!
例如肿瘤迁移、干细胞分化、细胞增殖、细胞凋亡等,不同的功能实验取决于你的实验本身目的。在这一步中,通常要设计定量和定性研究,例如细胞增殖,需要判断细胞增殖的比例、以及细胞增殖周期中的蛋白表达变化。
4、后面的一步是机制研究,机制研究主要有三点:通路研究、蛋白相互作用研究和基因转录前后的研究。可以选择其中一点来做,也可以三者都做。
通过机制研究,来解释药物作用对细胞功能学改变的途径。
由此形成典型的三步:
1 药物模型的建立、
2 功能改变的探究、
3 机制的发现。
上述研究方法,我司有着雄厚技术的支持,可以帮您完成经典的纯细胞分子生物研究,我们有丰富的细胞库、扎实的大生物研究经验、以及个性化实验方案修正,帮助您攻克实验过程中的各种技术难关。更多科研消息,欢迎详询我司。