资讯中心

首页 - 资讯中心
人甲状腺过氧化物酶(TPO)ELISA试剂盒应用
时间: 2022-09-21 09:34:21

      人甲状腺过氧化物酶(TPO)ELISA试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中人甲状腺过氧化物酶(TPO)的含量。


检测原理:

      试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被人甲状腺过氧化物酶(TPO)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人甲状腺过氧化物酶(TPO)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。

样品收集、处理及保存方法:

1.血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2.血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3.细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4.组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
操作步骤
1.从室温平衡60min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3.待测样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;
4.随后标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
返回顶部 微信咨询 021-54720761 021-54720761 点我QQ咨询 点我QQ咨询