产品仅供教研使用,用于定量检测细胞培养上清、血清、血浆中 人OAS2。
简介
2,5寡腺苷酸合成酶2,也被称为OAS2,是由OAS2基因编码的酶,该基因编码2-5A合成酶家族的成员,该家族是参与对病毒感染的先天免疫应答的必需蛋白质,编码的蛋白质由干扰素诱导,并在2’特异性核苷酸转移反应中使用三磷酸腺苷合成2’,5’-寡腺苷酸,这些分子激活潜在的RNaseL,从而导致病毒RNA降解并抑制病毒复制。
本试剂盒采用双抗体夹心法ELISA技术:将捕获抗体包被于酶标板上,捕获样品及标准品中的待测物OAS2,清洗后,再加入生物素标记的检测抗体进行孵育后清洗,形成“捕获抗体-抗原-检测抗体”免疫复合物,随后加入链霉亲和素偶联的辣根过氧化物酶进行孵育,待孵育结束后清洗,接着加入TMB显色后,若样本中有待测物则显蓝色,加入终止液停止反应。检测过程中游离的成分均被洗去,用酶标仪在450 nm处测OD值,颜色的深浅和样品中的待测物的含量呈正比,通过绘制标准曲线计算出样本中OAS2的浓度。
8. 佩戴防护手套、防护服、眼睛和面部防护用品。处理后彻底洗手。
抗体工作液配置 : 使用前10分钟,将100×生物素化抗体于1000×g离心1分钟,随后用1×稀释液将100×生物素化抗体稀释成1×生物素化抗体工作液,根据所需用量当日配置当日使用。
酶结合物工作液配置 : 使用前10分钟,将100×SA-HRP溶液于1000×g离心1分钟,随后用1×稀释液将100×SA-HRP稀释成1×SA-HRP工作液,根据所需用量配置。
备 注:如待测样本中OAS2浓度高于标准品最高值,请根据实际情况选择适当的稀释倍数。
以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验数据建立标准曲线。
标准品浓度(ng/mL) |
50 |
25 |
12.5 |
6.25 |
3.125 |
1.563 |
0.782 |
0 |
OD值 |
2.456 |
1.619 |
0.953 |
0.688 |
0.451 |
0.272 |
0.196 |
0.05 |
校正OD值 |
2.406 |
1.569 |
0.903 |
0.638 |
0.401 |
0.222 |
0.146 |
0 |
本图所示标准曲线仅供示例,结果计算应以同次试验标准品所绘标准曲线为准计算样本结果。
实验步骤
6. 终止反应:待显色反应结束后,每孔加入50μL终止液,轻轻混匀,5分钟内用预热完成的酶标仪在450nm处测吸光值。
回收率
回收率在不同基质的整个测定范围内选取在健康 人血清、血浆和细胞培养上清中加入3个不同浓度水平计算回收率。
线性关系
分别在选取的4份健康 人血清、血浆和细胞培养上清中加入高浓度OAS2,在标准曲线动力学范围内进行稀释,评估线性。
注意事项
本公司 人ELISA试剂盒检测范围、灵敏度等实验数据,因检测样本的不同会有所调整,实际数据以随货说明书为准。