DAPI染色液(DAPI Staining Solution)是适用于常见细胞和组织细胞核染色的染色液。DAPI,即2-(4-Amidinophenyl)-6-indolecarbamidine dihydrochloride,也称DAPI dihydrochloride,分子式为C16H15N5·2HCl,分子量为350.25,是可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料,和双链DNA结合后可以产生比DAPI自身强20多倍的荧光,灵敏度高于EB。
DAPI染色常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。DAPI也常用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链DNA染色。DAPI的最大激发波长为340nm,最大发射波长为488nm,DAPI和双链DNA结合后,最大激发波长为364nm,最大发射波长为454nm。DAPI染色液(10ug/ml)可以直接用于固定细胞或组织的细胞核染色,亦可以根据实验具体要求,稀释到相应浓度后进行染色。一般推荐工作浓度为0.5~10μg/ml,推荐用于较难染色的细胞。
自备材料:
荧光显微镜
蒸馏水
微量移液器
PBS或生理盐水
染色结果:细胞发生凋亡时,会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染,或呈碎块状致密浓染。
注意事项:
DAPI染色液(10μg/ml)的浓度适用于较难染色的细胞。
荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽快检测。
为减缓荧光淬灭,可以使用抗荧光淬灭封片液。
避免反复冻融,否则容易失效。
DAPI对人体有一定刺激性,请注意适当防护。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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