苏木素(Hematoxylin)和伊红(Eosin)联合染色,简称HE染色,是病理学常规制片中最基本的染色方法,应用极其广泛。苏木精是从原产中南美的洋苏木中提取出来的浅黄褐色的结晶,是一种碱性染色剂,它在被氧化后生成苏木素,同媒染剂(常用的是三价的铝或盐铁)一起使用,能够使细胞核染色。在病理诊断、教学和科研工作中,常用HE染色对正常组织和病变组织进行形态结构观察。对于确定或鉴别病变组织、细胞中出现的某些异常物质与特殊成分,而需要采用的特殊染色方法、酶组织化学方法、免疫组织化学方法等也均是在观察HE染色组织切片的基础上进行的。在HE染色的组织切片中,细胞核呈蓝色,细胞浆呈红色,二者形成鲜明的对比,易于观察分析。
苏木素伊红染色液中,苏木素染色液采用自主研发的配方,由进口的高纯度苏木精、氧化剂等组成,不含氧化汞、甲醇等有害物质,对细胞核染色效果好。其特点是不易产生沉淀和金属; 应用范围广,可以用于人、动物、畜牧、水产等领域,可以用于组织石蜡切片、冰冻切片和组织细胞的染色等;苏木素染色液可以重复使用。
染色原理:
细胞核染色的原理:
分化作用:
染色后,用某些特定的溶液将组织过多结合的染色剂脱去,这个过程称为分化作用,所用的溶液称为分化液。在HE染色中常用1%盐酸乙醇作为分化液,因酸能破坏苏木素的醌型结构,使组织与色素分离而退色。大多数组织经苏木素染色后,必须用1%盐酸乙醇分化,使细胞核过多结合的苏木素染料和细胞浆吸附的苏木素染料脱去,再进行伊红染色,才能保证细胞核与细胞浆染色的分明。
自备材料:
1、盐酸乙醇分化液
2、蓝化液,如稀氨水、碳酸锂溶液等
3、系列乙醇
4、4%多聚甲醛
操作步骤(仅供参考):
(一)石蜡切片染色
1、 切片脱蜡至水
2、脱水、透明、封固
染色结果:细胞核呈蓝色;细胞质、肌纤维、胶原纤维、甲状腺胶质等呈深浅不一的红色;角蛋白、红细胞等呈明亮的橙红色。
(二)冰冻切片染色
1、乙醚-乙醇混合固定液
2、自来水冲洗 2~5s
3、苏木素染色液滴染1~2min(可加热至50℃)。 备选方案:
1、 无需脱蜡,直接迅速用蒸馏水冲洗2~3min.
2、 染色、脱蜡、透明、封固步骤同石蜡切片的染色步骤。
染色结果:细胞核呈蓝色;细胞质、纤维呈红色。
(三)细胞染色
染色结果:细胞核呈蓝色;细胞质、纤维呈红色。
注意事项:
切片脱蜡应尽量干净。系列乙醇应经常更换新液。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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