产品仅供教研使用,用于定量检测细胞培养上清、血清、血浆中 人TAZ。
简介
Tafazzin蛋白是一种蛋白质,由TAFAZZIN基因编码,Tafazzin在心脏和骨骼肌中高度表达,并作为一种磷脂-糖磷脂转酰酶(它属于磷脂:二酰甘油酰基转移酶)发挥作用,它催化未成熟的心磷脂重塑为成熟的成分,其中主要是四氢油酰基,TAFAZZIN基因产生几种不同的tafazzin蛋白异构体,每个异构体都有一个长的形式和一个短的形式;短的形式缺乏一个疏水的领导序列,可能作为一个细胞质蛋白而不是膜结合蛋白存在,其他交替剪接的转录本已被描述,大多数异构体在所有组织中都有,但有些只在某些类型的细胞中发现,TAFAZZIN基因位于X染色体q臂的第28位,它跨越了10,208个碱基对,该基因产生一个21.3kDa的蛋白质,由184个氨基酸组成,TAFAZZIN 基因的突变与线粒体缺陷 、巴特综合征、扩张型心肌病(DCM)、肥厚型DCM、心内膜纤维化、左心室不压迫(LVNC)、乳腺癌、甲状腺乳头状癌、非小细胞肺癌、胶质瘤、胃癌、甲状腺肿瘤和直肠癌有关。
本试剂盒采用双抗体夹心法ELISA技术:将捕获抗体包被于酶标板上,捕获样品及标准品中的待测物TAZ,清洗后,再加入生物素标记的检测抗体进行孵育后清洗,形成“捕获抗体-抗原-检测抗体”免疫复合物,随后加入链霉亲和素偶联的辣根过氧化物酶进行孵育,待孵育结束后清洗,接着加入TMB显色后,若样本中有待测物则显蓝色,加入终止液停止反应。检测过程中游离的成分均被洗去,用酶标仪在450 nm处测OD值,颜色的深浅和样品中的待测物的含量呈正比,通过绘制标准曲线计算出样本中TAZ的浓度。
8. 佩戴防护手套、防护服、眼睛和面部防护用品。处理后彻底洗手。
抗体工作液配置 : 使用前10分钟,将100×生物素化抗体于1000×g离心1分钟,随后用1×稀释液将100×生物素化抗体稀释成1×生物素化抗体工作液,根据所需用量当日配置当日使用。
酶结合物工作液配置 : 使用前10分钟,将100×SA-HRP溶液于1000×g离心1分钟,随后用1×稀释液将100×SA-HRP稀释成1×SA-HRP工作液,根据所需用量配置。
备 注:如待测样本中TAZ浓度高于标准品最高值,请根据实际情况选择适当的稀释倍数。
以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验数据建立标准曲线。
标准品浓度(ng/mL) |
10 |
5 |
2.5 |
1.25 |
0.625 |
0.313 |
0.157 |
0 |
OD值 |
2.424 |
1.709 |
1.051 |
0.718 |
0.532 |
0.26 |
0.197 |
0.072 |
校正OD值 |
2.352 |
1.637 |
0.979 |
0.646 |
0.46 |
0.188 |
0.125 |
0 |
本图所示标准曲线仅供示例,结果计算应以同次试验标准品所绘标准曲线为准计算样本结果。
实验步骤
6. 终止反应:待显色反应结束后,每孔加入50μL终止液,轻轻混匀,5分钟内用预热完成的酶标仪在450nm处测吸光值。
回收率
回收率在不同基质的整个测定范围内选取在健康 人血清、血浆和细胞培养上清中加入3个不同浓度水平计算回收率。
线性关系
分别在选取的4份健康 人血清、血浆和细胞培养上清中加入高浓度TAZ,在标准曲线动力学范围内进行稀释,评估线性。
注意事项
本公司 人ELISA试剂盒检测范围、灵敏度等实验数据,因检测样本的不同会有所调整,实际数据以随货说明书为准。