产品名称

TNE缓冲液(10×,pH7.4)

产品编号

JLC－SJ2256

产品有效期

12个月

产品保存条件

RT

产品介绍

TNE缓冲液(10×,pH7.4)主要由Tris、EDTA、NaCl组成，所以简称为NTE缓冲液。该试剂主要用于吸收和荧光光谱学定量RNA和DNA，只要考虑了污染物和缓冲液组分的作用，吸收测量时很直接简单的方法，荧光分析比A260更不易受干扰。

自备材料：

1、 分光光度计

2、 石英杯

3、 牛胸腺DNA标准溶液

操作步骤(仅供参考)：

用去离子水稀释TNE缓冲液(10×,pH7.4)至1×。

取1ml 1×TNE缓冲液吸入石英杯，放入单光束或双光束分光光度计中，在352nm处读值，仪器调零。该空白溶液作为双光束仪器的参照。对于单光束分光光度计，去除空白杯，插入含有DNA样品或标准品的石英杯，读数。在280nm(蛋白)、260nm(核酸)、230nm(肽、酚、尿素)重复该过程。

用A260读数代入如下方程计算核酸的浓度(C)：

单链DNA: C(pmol/μl)= A260/(10×S) C(μg/ml)= A260/0.027

双链DNA: C(pmol/μl)= A260/(13.2×S) C(μg/ml)= A260/0.020

单链RNA: C(μg/ml)= A260/0.025

寡核苷酸: C(pmol/μl)= 100×A260/(1.5NA+0.71NC+1.2NG+0.84NT)

其中，S代表DNA大小(单位是kb)，N代表碱基数。

用A260/A280比值和A230和A325处的读值来估计核酸样品的纯度，比值在1.8～1.9显示DNA纯度高，比值在1.9～2.0显示RNA纯度高。

注意事项：

如果每次的使用量很小，可以适当分装后再使用。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。