生物素标记探针的可检出性在于每kb碱基中渗入的生物素分子数,可通过比色法检测。碱性磷酸酶缓冲液(pH7.5)由100mM NaCl、100mM Tris以及微量Mg2+组成,经无菌处理,可用于上述实验过程中漂洗硝酸纤维素膜或尼龙膜,亦可作为交联物的稀释液。
操作步骤(仅供参考):
按实验具体要求操作或参考如下步骤操作。
封闭前漂洗时,用少量该缓冲液漂洗膜1min,以水化。
稀释时,用10ml该溶液稀释交联物至终浓度1μg/ml。
封闭后漂洗时,用200ml该溶液漂洗膜2次,每次15min后,再用碱性磷酸酶缓冲液(pH9.5),轻微漂洗10min。
采用NBT/BICIP法检测。
注意事项:
如果每次的使用量很小,可以适当分装后再使用。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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