Proteinase K中文名为蛋白酶K,不含DNase,不含RNase,可直接用于消化各种蛋白以及常见的分子生物学、细胞生物学等相关实验,例如基因组DNA抽提、酶的消化去除等。酶活力:其含量>30U/mg, 在37℃以血红蛋白为底物,1分钟内可以产生相当于1μM酪氨酸Folin阳性的氨基酸或多肽的蛋白酶K的量,定义为一个单位蛋白酶K酶活力。有效的pH范围为pH4.0~12.5,最佳pH范围为pH7.5~8.0。
蛋白酶K的最佳反应温度为65℃,大于65℃蛋白酶K会迅速地降解,一般采用反应50~55℃。在0.2~1%SDS或约10mM尿素存在的情况下,蛋白酶K显示更高的酶活性,常用工作浓度为0.05~1mg/ml。
操作步骤(仅供参考):
根据具体实验要求操作。
一般工作浓度为0.05~1mg/ml。
注意事项:
1、根据所用缓冲液是否含有SDS、尿素、pH是否适合、温度是否适合等因素确定具体的工作浓度。
2、常用浓度的EDTA、Triton X-100、Tween 20、Sarkosyl、盐酸胍对蛋白酶K活力影响不大。
3、应避免反复冻融,以免酶活力下降。
4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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