Western转移缓冲液又称蛋白印迹转移缓冲液或转膜缓冲液,适用于Western Blot实验中把蛋白质转移到PVDF膜或硝酸纤维素(NC)膜上,以便进行抗体的孵育和下游实验。
Western转移缓冲粉剂主要成分为Tris、甘氨酸等,不含甲醇,主要用于蛋白质转移到PVDF膜或硝酸纤维素(NC)膜,不适用于把蛋白质转移到尼龙膜上。该试剂为粉剂,溶解于去离子水后使用。
操作步骤(仅供参考):
1、 取1L包装的Western转移缓冲粉剂,充分溶解于去离子水,即为1×Western转移缓冲液。
2、 按1×Western转移缓冲液:无水甲醇=4:1的比例Western转移配制工作液。大多数情况下取1×Western转移缓冲液480ml加入120ml甲醇即可。
3、 大多数蛋白质转移,应置于4℃进行,以防止蛋白降解。
注意事项:
尽量选择优级甲醇,分析纯甲醇也可使用。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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