丽春红(Ponceau S)染色液可以用于PVDF膜、硝酸纤维素膜(NC)和醋酸纤维素膜(Cellulose Acetate Membrane)上的蛋白检测, 但不适用于尼龙膜。转移后的蛋白质(大于200 ng/条带)在粉红色的背景上呈现红色的条带。丽春红S染色不仅简单快速,而且可逆。当印迹膜要再次用于第二种检测方法(如免疫印迹)时,这种染色方法特别有利。丽春红S染色剂是一种水溶性阴离子重氮染料,由重氮氨基偶氮苯二磺酸和萘酚二磺酸耦合到四钠盐上。其分子式为C22H12N4Na4O13S4,分子量为760.6。丽春红带负电荷,可以与带正电荷的氨基酸残基结合,同时丽春红也可以与蛋白的非极性区相结合,从而形成红色的条带。
丽春红S染色液(10×Ponceau S)优点在于:1、染色可逆:染色后可以用蒸馏水、PBS或其它适当溶液冲洗至背景清晰后拍照,可以做后续试验,如ECL、Dot-ELISA等。2、使用方便、本底低、灵敏度较高、性能长期稳定、着色清晰灵敏、可检测250ng以上的蛋白。
操作步骤(仅供参考):
1、 按10×Ponceau S:蒸馏水=9:1配制1×Ponceau S工作液。
2、 将PVDF膜、硝酸纤维素膜或醋酸纤维素膜浸没在1×Ponceau S工作液中,室温摇动3~5min或更长时间,直至出现清晰条带。对结果作适当记录或拍照。
注意事项:
1、 丽春红S染色液不适用于尼龙膜上的蛋白的检测。
2、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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