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病理染色液

TMB单组份显色液（ELISA HRP显色用）
英文名：TMB单组份显色液

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产品信息

产品简介：

TMB ，即3 , 3′ ,5 ,5′-Tetramethylbenzidine ，是辣根过氧化物酶的常用底物。在辣根过氧化物酶或其他适当过氧化物酶的催化下，TMB 会产生可溶性蓝色产物。蓝色产物通常可以在370nm 或620-650nm 测定吸光度。加入硫酸后，溶液呈黄色，此时可以在450nm 测定吸光度。本试剂盒常用于ELISA 检测，也可以用于检测血液或血红蛋白等样品中的过氧化物酶含量。用于ELISA 检测时，每个样品通常使用0.2 毫升显色液。

使用说明：

1 . 根据参考ELISA 试剂盒的实验步骤，在与辣根过氧化物酶标记的抗体孵育后，用适当洗涤液洗涤3-5次，每次3-5分钟。

2 . 经HRP 标记物孵育并充分洗涤后，酶标板每孔加入200ul TMB 显色液。
3 . 室温避光孵育3-30 分钟或更长时间(可长达24 小时)，直至显色至预期深浅。
4. 加入50 微升2M H2SO4 终止反应，随后在450nm 测定吸光度如果背景(没有样品的对照孔)显色太深，一方面需考虑使用适当的封闭液进行封闭，另一方面可以考虑缩短显色时间，或降低二抗浓度。另外，选择适当强度的洗涤液，或延长洗涤时间也会有所帮助。
5 . 适当提高一抗或二抗的浓度。检测二抗效果，滴一滴稀释二抗在离心管内，检测二抗是否可以被正常显色。
6. 可以考虑使用更加灵敏的放大检测体系，例如使用生物素检测体系。
7. 可以适当延长显色时间。

注意事项：

1 . TMB 对人体有刺激性，请注意适当防护。
2 . 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。