小鼠抗人乙肝表面抗原抗体(HBsAb)ELISA试剂盒(双抗原夹心ELISA)
产品仅供教研使用,用于定量检测细胞培养上清、血清、血浆中 小鼠HBsAb。
简介
乙肝表面抗体是保护性的抗体,主要是乙肝病毒表面抗原刺激机体免疫系统而产生的抗体。它的出现,能中和掉体内的乙肝病毒。当乙型肝炎病毒侵入身体后,刺激免疫系统产生免疫反应,免疫系统中的B淋巴细胞分化成的效应B细胞(浆细胞)分泌出一种特异的免疫球蛋白G,就是表面抗体,它可以和表面抗原特异地结合,然后在体内与其他免疫功能共同作用下,可以把病毒清除掉,不再受乙肝病毒的感染,故称表面抗体为保护性抗体。
本试剂盒采用双抗体夹心法ELISA技术:将捕获抗体包被于酶标板上,捕获样品及标准品中的待测物HBsAb,清洗后,再加入生物素标记的检测抗体进行孵育后清洗,形成“捕获抗体-抗原-检测抗体”免疫复合物,随后加入链霉亲和素偶联的辣根过氧化物酶进行孵育,待孵育结束后清洗,接着加入TMB显色后,若样本中有待测物则显蓝色,加入终止液停止反应。检测过程中游离的成分均被洗去,用酶标仪在450 nm处测OD值,颜色的深浅和样品中的待测物的含量呈正比,通过绘制标准曲线计算出样本中HBsAb的浓度。
8. 佩戴防护手套、防护服、眼睛和面部防护用品。处理后彻底洗手。
抗体工作液配置 : 使用前10分钟,将100×生物素化抗体于1000×g离心1分钟,随后用1×稀释液将100×生物素化抗体稀释成1×生物素化抗体工作液,根据所需用量当日配置当日使用。
酶结合物工作液配置 : 使用前10分钟,将100×SA-HRP溶液于1000×g离心1分钟,随后用1×稀释液将100×SA-HRP稀释成1×SA-HRP工作液,根据所需用量配置。
备 注:如待测样本中HBsAb浓度高于标准品最高值,请根据实际情况选择适当的稀释倍数。
以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验数据建立标准曲线。
标准品浓度(mIU/mL) |
80 |
40 |
20 |
10 |
5 |
2.5 |
1.25 |
0 |
OD值 |
2.451 |
1.645 |
0.993 |
0.655 |
0.44 |
0.237 |
0.131 |
0.055 |
校正OD值 |
2.396 |
1.59 |
0.938 |
0.6 |
0.385 |
0.182 |
0.076 |
0 |
本图所示标准曲线仅供示例,结果计算应以同次试验标准品所绘标准曲线为准计算样本结果。
实验步骤
6. 终止反应:待显色反应结束后,每孔加入50μL终止液,轻轻混匀,5分钟内用预热完成的酶标仪在450nm处测吸光值。
回收率
回收率在不同基质的整个测定范围内选取在健康 小鼠血清、血浆和细胞培养上清中加入3个不同浓度水平计算回收率。
线性关系
分别在选取的4份健康 小鼠血清、血浆和细胞培养上清中加入高浓度HBsAb,在标准曲线动力学范围内进行稀释,评估线性。
注意事项
本公司 小鼠ELISA试剂盒检测范围、灵敏度等实验数据,因检测样本的不同会有所调整,实际数据以随货说明书为准。