大鼠谷氨酸(GLU)定量检测试剂盒
定量检测血清、血浆、细胞培养上清液中大鼠谷氨酸(GLU)定的浓度。
使用试剂盒前,必须仔细阅读本说明书。
实验原理
本试剂盒采用竞争法酶联免疫吸附试验(ELISA)。在预包被抗大鼠谷氨酸(GLU)抗体(固相抗体)的微孔酶标板中,加入大鼠谷氨酸(GLU)校准品和待测样本,再加入HRP标记的大鼠谷氨酸(GLU)抗原(酶标抗原),经过温育与充分洗涤,去除未结合的组分,在微孔板固相表面形成固相抗体-酶标抗原的免疫复合物。加底物A和B,底物在HRP催化下,产生蓝色产物,在终止液(2M 硫酸)作用下,最终转化为黄色,在酶标仪450nm波长上测定吸光度(OD值),吸光度(OD值)与待测样品中大鼠谷氨酸(GLU)的浓度负相关。拟合校准品曲线,可以计算出样本中大鼠谷氨酸(GLU)的浓度。
试剂盒限制性
1、仅供科研使用,不得用于临床诊断。
2、在试剂盒标示的有效期内使用,过期产品不得使用。
3、跟其他厂家的试剂盒或者组分不能混用。
4、使用试剂盒配套的样品稀释液。
5、如果样本值高于最高标准品浓度值,请将样本适当稀释后,再重新测定。
6、待测样本中存在的人抗鼠等异嗜抗体会干扰检测结果,检测前,请排出该因素。
7、通过其他方法得到的检测结果,与本试剂盒测定结果不具有直接的可比性。
技术提示
1、混合蛋白溶液时,避免起泡。
2、加校准品与样本时,每个校准品浓度和样本都要更换移液枪头,公共组分应该悬臂加样,避免交叉污染。
3、合适的温育时间,和充分的洗涤步骤,是保证实验结果准确性的必要条件。
4、使用自动洗板机时,加入一个30秒浸泡的步骤,可以提高检测精度。
5、底物溶液为无色液体,保存过程中变为蓝色,代表底物溶液已经失效,不得使用。
6、终止液加样顺序与底物溶液加样顺序一致,加入终止液后,蓝色底物产物,会瞬间变为黄色。
7、实验中,用剩的板条,应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
8、所有液体组分,使用前充分摇匀,严格按照说明书标明的时间、加样量及加样顺序进行温育操作。
其他用品
1、酶标仪(450nm)
2、精密移液器及一次性吸头
3、蒸馏水
4、洗瓶或者自动洗板机
5、37℃水浴锅或恒温箱
6、500ml量筒
生物安全
1、检测必须符合实验室管理规范的规定,严格防止交叉污染,所有样品、洗弃液和各种废弃物都应按照传染物进行处置。
2、试剂盒的液体组分中,含有proclin-300防腐剂,可能引起皮肤过敏反应,避免吸入烟雾与皮肤接触。
3、底物液对皮肤、眼睛和上呼吸道有刺激作用,避免吸入烟雾。
4、戴上防护手套,实验完成后彻底洗手。