产品名称

Hoechst33342/PI细胞凋亡染色试剂盒

产品编号

JLC0612

产品规格

100T

产品价格

290

    产品有效期

6个月

产品保存条件

-20℃ 避光

产品介绍

Hoechst33342/PI细胞凋亡染色试剂盒(Hoechst 33342/PI Apoptotis Assay Kit)是一种采用Hoechst 33342和碘化丙啶(Propidium Iodide，PI)双荧光染色方法进行细胞周期与细胞坏死分析的检测试剂盒。单纯的PI染色能够观察DNA直方图上凋亡细胞的亚G1峰，但只能代表G0/G1期发生凋亡，无法观察S期和G2期发生的细胞凋亡，而且细胞经过固定后无法对活细胞和死细胞进行区分。Hoechst 33342可以穿透细胞膜，进入正常细胞和凋亡细胞与DNA结合，能在紫外线下显示蓝色荧光，而且染色后凋亡细胞荧光会比正常细胞明显增强。PI不能穿透细胞膜，对于具有完整细胞膜的正常细胞或凋亡细胞不能染色。而对于坏死细胞，其细胞膜的完整性丧失，PI可以穿透细胞膜使坏死细胞着色产生红色荧光。

Hoechst 33342/PI双染后，可在流式细胞仪上将正常细胞、凋亡细胞和坏死细胞区别开来。在二元直方图上，正常细胞对Hoechst33342具有拒染性，呈弱蓝色荧光＋弱红色荧光(Hoechst 33342+/PI+)；凋亡细胞对Hoechst33342具有嗜染性呈强蓝色荧光+弱红色荧光(Hoechst 33342++/PI+)；坏死细胞对PI具有嗜染性，呈弱蓝色荧光＋强红色荧光。本试剂盒亦可用荧光显微镜进行观察，检测细胞含量范围一般为0.1～1×106之间。

自备材料：

胰蛋白酶消化液

流式细胞仪或荧光显微镜

PBS

细胞计数板

染色结果：在蓝色荧光对红色荧光的散点图上，正常细胞呈低蓝光/低红光，凋亡细胞呈高蓝光/低红光，坏死细胞呈低蓝光/高红光。

注意事项：

荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽快检测。

在为了获得细胞沉淀的离心的过程中，对于特殊细胞，如果细胞沉淀不充分，可以适当提高离心力或延长离心时间。

Heochst 33342与细胞孵育的时间不宜过长，一般控制在20min以内。太长容易引起Heochst 33342的发射光谱由蓝光向红光迁移，导致红色荧光与兰色荧光的比例改变。

如果用于组织的细胞周期与细胞凋亡检测，则必须把组织消化后，制备成单细胞悬液，才可以进行检测

PI对人体有一定刺激性，请注意适当防护。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。