自噬(autophagy)是细胞受到刺激后吞噬自身的细胞质或细胞器,最终将吞食物在溶酶体内降解的过程,自噬体(autophagosome)为双层膜包被的圆形或椭圆形结构,内含细胞质、长寿蛋白质和异常蛋白聚集物,损伤或多余细胞器如线粒体、粗面内质网和微体、病毒和细菌等。
单丹磺酰尸胺(Dansylcadaverine,MDC )是一种荧光色素,是嗜酸性染色剂,通常被用于检测自噬体形成的特异性标记染色剂,其检测激发滤光片波长355nm。阻断滤光片波长512nm。细胞自噬染色检测试剂盒(MDC法),适用于培养细胞的自噬染色,又称为MDC染色液,可与EB合用双染。
自备材料:
荧光显微镜
低速离心机
EB
载玻片、盖玻片
染色结果:
正常细胞
细胞被均匀染成黄绿色荧光
凋亡细胞
染色质浓缩,细胞核碎裂成点状,被染成大小不一、致密浓染的绿色颗粒
注意事项:
MDC Stain和EB,试剂有一定毒性,请小心操作。
吖啶橙染色常与EB染色合用,可区分出正常细胞、凋亡细胞及坏死细胞。
操作过程中应注意减少试剂暴露于强光下的时间。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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