伊红(Eosin)又称曙红,属人工合成染料中的呫吨类染料,为桃红色或粉红色的粉末。分子式为C20H6O5Br4Na2,分子量为691.86。
临床上,可通过检测精子膜的完整性来评价精子的存活率,用精子活体染色液(伊红法)可以常规检测所有精子标本的存活率,通过染料拒染法来鉴别细胞膜完整的精子,从而得出活精子的百分率。该染色液由伊红、去离子水等组成,利用了染料拒染原理,即相关基于损伤的细胞膜,如在非活的(死)细胞上的膜,允许非透过膜性染料可进入膜内染色;而活细胞的细胞膜能够抗拒染料进入,所以产生拒染现象,不着色。该染色液液仅适用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。
操作步骤:
1、 取洁净载玻片,滴加新鲜精液和精子活体染色液(伊红法)各1滴,混匀。
2、 加盖盖玻片,放置30~60s,立即在高倍镜(可用400×)下观察。
3、 计数200个精子,计算未着色(活精子)占200个精子的百分率。
染色结果:
活精子
不着色
死精子
红色
注意事项:
精液标本一旦液化应立即检测精子存活率,最好在30min内,在任何情况下都不能超过1h,以免因脱水或温度变化导致精子失活而使染色检测结果不准。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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