不同的氨基酸带有不同化学性质的侧链基团,有的带有碱性侧链,有的带有酸性侧链,由此组成的蛋白质具有不同数目的碱性基团和酸性基团,这些基团会使蛋白质在不同的pH溶液中带有不同的净电荷,整个蛋白质分子带正电荷多,即为碱性蛋白。
碱性固绿染色液是利用碱性蛋白质与带有负电荷的碱性染料固绿结合进行染色,细胞中含量最为丰富的碱性蛋白为组蛋白,主要存在于细胞核中,因此染色后细胞核大部分被染成绿色。该染色液仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。
自备材料:
玻片
70%乙醇
水浴锅
显微镜
操作步骤:
取新鲜血液1滴滴于载玻片一端,推片,室温晾干。
涂片浸入70%乙醇中固定5min,室温晾干。
涂片浸入酸性分化液中,60℃水浴30min。
流水充分水洗,滤纸吸去残留水分。
涂片浸入碱性固绿染色液染色15min。
流水冲洗,室温晾干。
直接镜检或滴加1滴中性树胶,加盖盖玻片进行封片观察。
染色结果:
细胞核大部分区域
绿色
细胞质、核仁
不着色
注意事项:
血液涂片或骨髓涂片应厚薄均匀,以免影响染色效果。
血细胞涂片染色要求新鲜全血或EDTA抗凝血。
酸性分化液孵育后,冲洗应彻底,否则会干扰固绿的染色。
染色过深可用甲醇或酒精适当脱色,最好不复染。
pH值对染色有一定影响,载玻片应清洁、无酸碱污染,以免影响染色效果。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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