瑞氏色素是酸性染料伊红(Eosin)和碱性染料亚甲蓝(Methylene Blue)组成的复合染料, 对原生质的染色有很好的区别作用。吉姆萨染液由天青Ⅱ与伊红混合而成,染色原理和结果与瑞氏染色法基本相同,姬姆萨染色液对胞浆着色力较强,能较好的显示胞浆的嗜碱性程度,特别对血液和骨髓细胞中的嗜天青、嗜酸性、嗜碱性颗粒,着色清晰,但是对胞核着色偏深,核结构显色不佳,常与故姬姆萨染液常与瑞氏染液联合使用。
Wright-Giemsa Stain以进口瑞氏色素和姬姆萨色素为主要原料,通过研磨配制而成,能呈现出清晰的细胞染色效果。经常用于血液和细胞涂片、骨髓细胞涂片、细菌染色。细胞质呈红色,细胞核及细菌呈蓝色,嗜酸性颗粒呈橘红色。染液中加中性甘油,防止甲醇挥发或氧化,同时也可使血细胞染色较清晰。该染液的特点: 由瑞氏-姆姆萨复合染色液和磷酸盐缓冲液组成,等量混合使用或分别处理标本使用。
自备材料:
载玻片
蒸馏水或去离子水
染色架
显微镜
操作步骤(仅供参考):
1、 常规方法制备血液涂片或骨髓涂片或细菌涂片,待涂片自然干燥。
2、 将血液涂片或骨髓涂片置于染色架上。
3、 滴加适量Wright-Giemsa Stain覆盖涂片,室温染色1~2min。
4、 涂片滴加等量磷酸盐缓冲液,轻轻晃动玻片或采用其他方式混合,使磷酸盐缓冲液与Wright-Giemsa Stain混匀,室温静置3~10min。
5、 步骤3、4亦可以采用如下方法: 取Wright-Giemsa Stain和磷酸盐缓冲液等量混合,即为Wright-Giemsa工作液,滴加该工作液于血液涂片或骨髓涂片上,室温静置3~10min。
6、 用自来水或蒸馏水从玻片一端轻轻冲洗。(注: 也可用磷酸盐缓冲液等量稀释后,冲洗玻片,时间控制在30s左右。)
7、 干燥。镜检: 先用低倍镜观察血涂片,再用油镜。
注意事项:
血液涂片或骨髓涂片应厚薄均匀,以免影响染色效果。
涂片染色中,请勿先去除染液或直接对涂片用力冲洗。不能先倒掉染液,以免染料沉着于涂片上。
染色液可重复使用,但不能多次重复,若有沉淀物应过滤后使用。
染色过深可用甲醇或乙醇适当脱色,最好不复染。
如果染色过深或过浅,应调整染色时间或工作液浓度。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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