瑞氏色素是酸性染料伊红(Eosin)和碱性染料亚甲蓝(Methylene Blue)组成的复合染料, 对原生质的染色有很好的区别作用。各种细胞成分化学性质不同,对各种染料的亲和力也不一样,如血红蛋白、嗜酸性颗粒为碱性蛋白质,与酸性染料伊红结合,染粉红色,称为嗜酸性物质;细胞核蛋白、淋巴细胞、嗜碱性粒细胞胞质为酸性,与碱性染料结合后,染紫蓝色或蓝色,称为嗜碱性物质;中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合,染淡紫红色,称为嗜中性物质。原始红细胞、早幼红细胞胞质、核仁含较多酸性物质,染成较浓厚的蓝色;中幼红细胞既含酸性物质,又含碱性物质,染成红蓝色或灰红色;完全成熟红细胞,酸性物质彻底消失后,染成粉红色。瑞氏染液为蓝色澄明液体,有甲醇特异香味,主要由美蓝、伊红、甲醇等组成,其中甲醇的作用是溶解美蓝和伊红以及固定细胞形态。
Wright Stain以进口瑞氏色素为主要原料,通过研磨配制而成,能呈现出清晰的细胞染色效果。该染液的特点:由Wright Stain和磷酸盐缓冲液组成,直接使用,无需任何配制过程,染液中加微量中性甘油,防止甲醇挥发或氧化,同时也可使血细胞染色较清晰。经常用于血液和细胞涂片、骨髓细胞涂片、细菌染色。细胞质呈红色,细胞核及细菌呈蓝色,嗜酸性颗粒呈橘红色。
自备材料:
载玻片
蒸馏水
染色架
显微镜
操作步骤(仅供参考):
常规方法制备血液涂片或骨髓涂片或细菌涂片,待涂片自然干燥。
将血液涂片或骨髓涂片置于染色架上。
滴加适量Wright Stain覆盖涂片,室温染色1~2min。
涂片滴加等量磷酸盐缓冲液,轻轻晃动玻片或采用其他方式混合,使磷酸盐缓冲液与Wright Stain混匀,室温静置3~10min。
用自来水或蒸馏水从玻片一端轻轻冲洗。(注: 也可先用磷酸盐缓冲液冲洗玻片,时间控制在30s左右。)
干燥。
镜检: 先用低倍镜观察血涂片,再用油镜。
注意事项:
血液涂片或骨髓涂片应厚薄均匀,以免影响染色效果。
涂片染色中,请勿先去除染液或直接对涂片用力冲洗。不能先倒掉染液,以免染料沉着于涂片上。
染色液可重复使用,但不能多次重复,若有沉淀物应过滤后使用。
染色过深可用甲醇或酒精适当脱色,最好不复染。
如果染色过深或过浅,应调整染色时间或工作液浓度。
pH值对染色有一定影响,载玻片应清洁、无酸碱污染,以免影响染色效果。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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