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  • 谷氨酰胺(Gln)含量检测试剂盒可见分光光度法

  • Glutamine (Gln)Content Assay Kit

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JLC-E9352 -50T/24S 50T/24S 3-7天 询价
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  • 产品信息

英文名称 ：Glutamine (Gln)Content Assay Kit
产品包装 ：盒装
产品规格 ：50T/48S
储存条件 ：-20℃
检测方法 ：可见分光光度法
有 效 期 ：6个月
自备试剂 ：该试剂盒实验过程中需自备试剂，详情见网站说明书
产品组成 ：

试剂名称

规格

保存条件

提取液一

液体70mL×1瓶

2-8℃保存

提取液二

液体15mL×1瓶(自备)

2-8℃保存

试剂一

液体3mL×1瓶

2-8℃保存

试剂二

粉剂×2瓶

-20℃保存

试剂三

液体10mL×1瓶

2-8℃保存

试剂四

粉剂×1瓶

-20℃保存

试剂五

粉剂×1瓶

-20℃保存

试剂六

液体8mL×1瓶

2-8℃保存

标准品

液体1mL×1支

2-8℃保存

溶液的配制 ：
1.提取液二：氯仿，需自备。
2.试剂二：试剂质量很小，有可能肉眼观察不到，直接使用即可。临用前取一支加入0.2mL蒸馏水，-20℃分装可保存4周，避免反复冻融。
3.试剂二工作液：提供一空棕色试剂瓶。根据样本量按试剂二：蒸馏水=0.2mL：2.8mL(约18S(的比例进行稀释，现用现配，使用时置于冰上。
4.试剂四：临用前加入40mL提取液一，用不完的试剂分装后-20℃可保存4周。避免反复冻融。
5.试剂五：临用前加入2.5mL试剂一，用不完的试剂分装后-20℃可保存4周，避免反复冻融，使用时置于冰上。
6.标准品：10μmol/mL谷氨酰胺标准液。
产品说明 ：
谷氨酰胺(Glutamine)简称Gln，是谷氨酸的酰胺，是组成蛋白质的重要氨基酸之一，同时谷氨酰胺也是三羧酸循环中α-酮戊二酸的主要来源。谷氨酰胺在生物体内以游离态和结合态两种状态存在，游离的谷氨酰胺是在生物体代谢中起着重要作用，其代谢占细胞和血液循环中自由氨基酸的60%以上。游离谷氨酰胺在谷氨酰胺酶的催化作用下转变为谷氨酸，谷氨酸脱氢酶(GDH)催化谷氨酸和NAD生成α-酮戊二酸、NADH和NH4+，在1-mPMS作用下，WST可与NADH反应，产生水溶性formazan，其在450nm处有吸收峰，据此可计算谷氨酰胺含量。




注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、低温离心机、水浴锅/恒温培养箱、可调式移液器、研钵/匀浆器/细胞超声破碎仪、氯仿、1mL玻璃比色皿、冰和蒸馏水。
操作步骤：
一、样本处理(可适当调整待测样本量)
1.组织：按照样本质量(g)：提取液一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液一)加入提取液一，冰浴匀浆；12000g4℃离心5min，取上清加入500µL提取液二，剧烈振荡5min，12000g4℃离心5min，取上层液体(呈清澈状态)置冰上待测(中层浑浊物质和下层液体不需要)。
2.细菌或细胞样本：收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清，按照细菌或细胞数量(10⁴个)：提取液一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL提取液一)加入提取液一，超声波破碎细菌或细胞(温度4℃,功率200W，超声3s，间隔7s，总时间3min)，12000g4℃离心5min，取上清加入500µL提取液二，剧烈振荡5min，12000g4℃离心5min，取上层液体(呈清澈状态)置冰上待测(中层浑浊物质和下层液体不需要)。
3.血清(浆)等液体样本：取500µL样本加入500µL提取液二(若溶液浑浊则需先离心后取上清)，剧烈振荡5min，12000g4℃离心5min，取上层液体(呈清澈状态)置冰上待测(中层浑浊物质和下层液体不需要)。
注 ：如果需要测蛋白浓度，需在加提取液二之前测定蛋白浓度。

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