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JLC-E9373 -50T/24S 50T/24S 3-7天 询价
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  • 产品信息

英文名称 ： α-Mannosidase(α-man)Activity Assay kit
产品包装 ： 盒装
产品规格 ： 50T/24S
储存条件 ： -20℃
检测方法 ： 可见分光光度法
有 效  期 ： 6个月
产品组成：

试剂名称

规格

保存条件

提取液一

液体60mL×1瓶

2-8℃保存

试剂一

液体50mL×1瓶

2-8℃保存

试剂二

粉剂×2支

-20℃保存

试剂三

粉剂20mL×1瓶

-20℃保存

试剂四

液体3mL×1瓶

2-8℃保存

标准品

液体1mL×1支

-20℃保存

溶液的配制：
1.　试剂二：临用前每支加入1mL试剂四溶解，溶解后的试剂在-20℃分装保存，可以保存 4 周。
2. 标准品：5mmol/L的对硝基苯酚标准液。
产品说明：
α-man 分布广泛、种类繁多，在真核生物胞质、内质网、高尔基体、溶酶体中都有发现，不同种类、功能的 α-man 共同参与 N-聚糖的修饰过程。
α-man 和特定底物发生反应，其生成物在 405nm 处有特征吸收峰，根据吸光度的变化率可计算出 α-man 活性。
注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者 增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、低温离心机、恒温培养箱/水浴锅、可调式移液器、1 mL 玻璃比色皿、匀浆器/研钵、冰和 蒸馏水。
操作步骤：
一、样本处理（可适当调整待测样本量）
1、组织：按照组织质量（g）︰提取液体积(mL)为 1︰5~10 的比例（建议称取约 0.1 g 组织，加入1 mL提取液）进行冰浴匀浆， 然后12000 g ，4℃, 离心 10 min，取上清置于冰上待测。
2、细胞或细菌：先收集细胞或细菌到离心管内，离心后弃上清；按照细胞或细菌数量（104  个）： 提取液体 积（mL）为 500~1000︰1 的比例（建议 500 万个细胞或细菌加入1 mL 提取液） 进行提取，冰浴超声波破碎细胞或细菌（功率200 W，超声3秒，间隔7秒，总时间 3 min）；然后12000 g ，4℃, 离心10 min，取上清置于冰上待测。
3、液体：直接检测。若有浑浊可以离心后测定

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