土壤磷酸二酯酶(S-PDE)活性试剂盒微量法 /48样
测定意义
土壤磷酸二酯酶是在土壤磷酸单酯酶之后的第二大磷酸酶,在土壤有机磷的循环代谢中起到重要作用。
测定原理
MUF在 355 nm波长处激发, 能在 450 nm处检测到荧光, 它与某些物 质结合后荧光特性消失, 通过酶的水解作用MUF释放出来, 通过检测荧光量来表征酶活性。
自备用品
酶标仪、台式离心机、恒温培养箱、可调式移液器、黑色96孔板和蒸馏水。
试剂组成和配制
试剂一:液体60mL×1瓶,4℃保存;
试剂二:粉剂×1瓶,-20℃避光保存(临用前加入0.24mL试剂三溶解后加入11.76mL蒸馏水混匀);
试剂三:液体8mL×1瓶 ,常温避光保存;
标准品:粉剂×1瓶,-20℃避光保存。
预实验的意义
比色法检测试剂盒预实验非常重要
1、确定该试剂盒是否适合客户的样本检测,以免造成试剂盒和样本的浪费(比如低表达处理的样本);
2、熟悉生化试剂盒的操作流程,尤其是初次使用生化试剂盒测定;
3、确定样本的处理方法及稀释倍数是否合适;
4、了解实验过程中可能出现的实验现象或问题,以便于及时作出调整;
5、通过3-5组预实验,判断试剂盒对于样本的适应稀释浓度范围,指导实验样本稀释比例。
注意
正式测定前务必取 3 - 5 个预期差异较大的样本做预测定。