软骨组织由软骨细胞和软骨基质组成,软骨组织及其周围的软骨膜构成软骨。软骨根据基质内所含纤维素成分不同分为透明软骨、弹性软骨、纤维软骨。软骨染色方法有很多种,例如甲苯胺蓝法、阿利新蓝法、番红O法等。
软骨染色液(番红O法)染色原理在于嗜碱性的软骨与碱性染料番红O结合呈现红色,番红O是一种结合多阴离子的阳离子染料,其显示软骨是基于阳离子染料与多糖中阴离子基团(硫酸软骨素或硫酸角质素)结合。番红O着色与阴离子的浓度近似成正比关系,间接反映基质中蛋白多糖的含量和分布。当软骨受到损伤时,软骨中的糖蛋白会释放出来,使基质成分分布不均匀,从而导致番红O淡染或不着色。通过图像分析软件可对番红O染色的软骨基质进行定量分析,番红O分化很关键,分化过度易导致切片不着色,分化不足易导致切片着色过深。
自备材料:
1、10%福尔马林固定液
2、脱钙液
3、蒸馏水
4、系列乙醇
操作步骤(仅供参考):
1、 标本的处理:10%福尔马林固定、脱钙、石蜡切片。
2、 常规脱蜡至水。
3、 蒸馏水洗1min。
4、 入Safranin O stain内浸染2~5min,蒸馏水洗1min。
5、 用Safranin分化液洗涤切片1~2min,蒸馏水洗1min。
6、 分别用95%乙醇、无水乙醇脱水。
7、二甲苯透明,光学树脂封固。
注意事项:
1、 切片在Safranin O stain中染色不宜过长,否则易导致背景的深红色不易分化掉。
2、 切片分化时间应恰当,以背景呈绿色为宜。
3、 Safranin O stain染色后,不宜在低浓度乙醇脱水,否则易褪色。
4、 95%乙醇脱水时间不宜过长。
5、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
|
共有(72)人参考评价
仅对购买过该产品的用户开放!
{comment_time|今天}
{content|默认评论}
{comment_time|今天}
{content|默认好评}
{comment_time|今天}
{content|默认中评}
{comment_time|今天}
{content|默认差评}