网状纤维(Reticular fiber)是网状结缔组织内的一种纤维,由网状细胞所产生,直径多在0.2~1.0μm,有韧性而没有弹性。网状纤维的染色方法很多,但染色原理基本一致,大都采用氨银浸法。Gordon-Sweets网状纤维染色原理是利用氨银液易被组织吸附与组织的蛋白质结合,经甲醛还原成黑色或棕黑色的金属银,沉积于组织内及其表面。
冰冻切片、低温切片和火棉胶切片均可用于网状纤维染色。各种固定液均可采用,重金属汞盐或锇盐固定液偶尔会产生一些非特异性银背景。常用于鉴别肿瘤的性质和来源、癌与肉瘤、淋巴肉瘤与网状细胞肉瘤、血管内皮瘤与血管外皮瘤、骨尤文瘤与骨网状细胞肉瘤、脑膜瘤与星形细胞瘤、恶性神经鞘瘤及早期浸润癌等。
操作步骤(仅供参考):
1、组织固定于10%福尔马林固定液,常规脱水包埋。切片厚4μm,常规脱蜡至水。
2、氧化、漂白、媒染。
3、滴加Gordon-Sweets银氨溶液染色3min。
4、常规脱水透明,中性树胶封固。
注意事项:
1、玻璃器皿必须用洗涤液浸泡1天,自来水冲洗干净,蒸馏水冲洗2次。
2、10%福尔马林固定液是较为适合的固定液,不宜采用含汞的固定剂如Zenker液,否则易导致切片非特异性沉淀。
3、Gordon-Sweets银氨溶液不太稳定,对光的敏感性强,应4℃避免保存,恢复至室温后使用。
4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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