结缔组织狭义上是指其含有的三种纤维:胶原纤维、网状纤维、弹力纤维,而胶原纤维(collagen fiber)是分布最广、含量最多的一种纤维。Masson三色染色又称马松染色,是结缔组织染色中最经典的一种方法,是胶原纤维染色权威而经典的技术方法。所谓三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关:分子的大小由分子量来体现,小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织;而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织。Pollak三色染色是在Masson三色染色法基础上改良而来的结缔组织多色染色法,采用媒染剂和促染剂同时染色,可使结缔组织中的多种成分着色。
Pollak三色染色最大特点在于把Masson三色染色核心染料融合在一起,大大简化了操作步骤,另外其特点:①染色稳定;②分化时间短,1~2s;③适宜于石蜡切片④所染切片保存时间长且不易褪色。
自备材料:
1、10%中性福尔马林固定液
2、系列乙醇、蒸馏水
注意事项:
切片脱蜡应尽量干净。Weigert铁苏木素染液即配即用,一般24h失去染色力。
组织固定起着非常重要的作用,使用不同的固定液可延或缩短染色时间。
采用Weigert染细胞核,因为染色目的主要在于区分胶原纤维和肌纤维,一般也可以省略该染色步骤。
酸性乙醇的分化时间应根据切片厚薄、组织的类别和新旧而定。
Pollak染色液的染色时间应严格控制:染色时间过短,导致红色加深;染色时间过长,导致绿色或蓝色加深。
Pollak分化液可使色彩更清晰鲜艳,如用量大可自行配制0.1~0.3%乙酸溶液予以替代。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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