胶原纤维(Collagen Fiber)是结缔组织中分布最广含量最多的一种纤维,广泛分布于各种脏器,其中皮肤、巩膜、肌腱最丰富。Ⅰ型胶原纤维主要是骨、皮肤、肌腱纤维;Ⅱ型胶原纤维主要是软骨胶原;Ⅲ型胶原纤维主要在胚胎组织、成人血管、胃肠道;Ⅳ型胶原纤维主要在基膜中。Van Gieson胶原纤维染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关。分子的大小由分子量来体现,小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织,而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织。PA分子量小,丽春红和复红次之,淡绿分子量最大。VG染色后,肌纤维呈黄色,胶原纤维呈红色。
Van Gieson染色液常用于区分胶原纤维和肌纤维,可区分是胶原纤维源性肿瘤还是肌源性肿瘤,观察组织或器官的损伤、修复与纤维化程度。
操作步骤(仅供参考):
1、 切片脱蜡至水。
2、 用配制好的Weight铁苏木素染色1~5min。
3、 稍水洗。
4、 用酸性分化液分化数秒,水洗2min。
5、 用配制好的VG染色液染色5~10min。
6、 用滤纸吸干,直接用95%乙醇快速分化脱水。
7、 无水乙醇脱水,二甲苯透明,中性树胶封固。
注意事项:
1、 临用前配制试剂(A)、(C),不可预先配制后放置,一般24h后失去染色力。
2、 该染色液主要用于石蜡切片,若使用火棉胶或LVN(低黏度含氮纤维素)切片,火棉胶切片在VG染色后应用蒸馏水冲洗。
3、 上述试剂均有刺激性,请小心操作。
4、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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