碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,简称ALP或AKP)为一类磷酸酯酶,广泛分布于哺乳动物组织内,其活性所需最适pH 9.2~9.8。此酶主要存在于物质交换活跃之处(细胞膜),如肠上皮和肾近曲小管的刷状缘、附睾上皮之静纤毛、肝的毛细胆管膜以及微动脉和毛细血管动脉部之内皮,还见于内质网、高尔基复合体、吞饮小泡、肠上皮之溶酶体、中性粒细胞之中性颗粒以及平滑肌之细胞膜。
碱性磷酸酶染色液(偶氮偶联法)不是采用金属沉淀法来显示碱性磷酸酶活性,而是采用偶氮偶联法(又称同时偶联法),其原理是在pH9.2~9.8的碱性条件下,细胞内碱性磷酸酶可使AB-BI磷酸盐水解,释放出磷酸与萘酚,后者与偶联重氮盐生成有色产物,定位于细胞质中。该染液可用于血液、骨髓或细胞涂片、冰冻切片、梯度入水后的石蜡切片等的碱性磷酸酶染色, 碱性磷酸酶活性部位呈蓝色,位于胞桨,结果较金属盐沉淀法可靠。
自备材料:
1、 载玻片、湿盒
2、 显微镜
临床意义:
1、 类白血病反应积分明显增高,未经治疗的慢性粒细胞白血病积分明显减低。
2、 急性细菌性感染积分明显增高,病毒性感染积分多正常或减低。
3、 再生障碍性贫血积分常增高,PNH、MDS积分常减低。
注意事项:
血液或骨髓细胞涂片或其他样本均应新鲜,薄厚适宜,及时固定,否则会影响酶的活性。
培养细胞染色操作过程中,清洗、染色等步骤都应轻微,以免损伤或丢失细胞。
ALP孵育液易失效或降低阳性强度,即配即用,不宜久置。
复染时,核固红染色液或甲基绿染色液二者取其一。
每次染色时,应有阳性对照片。
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