细胞色素氧化酶(Cytochrome Oxidase,CO)被认为是线粒体膜固有的酶,在含有大量线粒体的细胞(如心肌、肾小管上皮以及胃壁细胞、肝细胞)内都具有高度活性。此酶活性往往作为细胞内氧化代谢的指标,亦作为线粒体的标志酶之一。
细胞色素氧化酶染色液(联苯胺法)染色原理是细胞色素氧化酶催化3,3-二氨基联苯胺(DAB)使其侧链的氨基氧化,进行反复的氧化性聚合和氧化性环化形成不溶性的棕色Phenazine聚合物。此酶对固定剂敏感,故须用新鲜切片。
自备材料:
1、 恒温培养箱
2、 光学显微镜
阴性对照(可选):
取新鲜配制好的DAB孵育液,按DAB孵育液:CO对照液=50:1的比例混合,即为CO对照工作液。相同切片入CO对照工作液,室温孵育30~60min,其余同上,呈阴性反应。
注意事项:
1、 本染色液适用于冰冻切片,同时应减少切片在室温暴露的时间。
2、 CO孵育液孵育时间因组织而异,心肌、肾孵育约20~30min,肝脏约50~60min,甲状腺滤泡上皮约2h。
3、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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