琥珀酸脱氢酶( succinate dehydrogenase,SDH)是此琥珀酸氧化酶系的第一个酶,位于线粒体内。琥珀酸脱氢酶是黄素蛋白酶,分子内含有-SH,决定着酶的活性,故封闭-SH者皆可作为抑制剂。此酶活性最适pH为7.6~8.5。此酶参与三羧酸循环,在组织化学上,常以此酶活性作为三羧循环的代表,亦作为线粒体的标志酶之一。含此酶活性高的组织为心肌、肾小管上皮和肝细胞。此酶对固定剂敏感,故需用新鲜组织切片。
琥珀酸脱氢酶染色液(四唑盐法)以琥珀酸为底物,在酶作用下脱氢,硝基蓝四唑(nitro BT)为受氢体,接受氢后被还原为甲噁,呈蓝紫色,用以代表琥珀酸脱氢酶的活性。NBT孵育液含有特殊的中间递氢体,可使定位更加准确,染色更加清晰。
自备材料:
1、 蒸馏水
2、 恒温箱或水浴锅
操作步骤(仅供参考):
冰冻切片,厚6μm,无需固定。
切片人NBT孵育液中,置于37℃温箱,浸染约5~30min。
蒸馏水冲洗。
甘油明胶封固。
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