细胞中的左旋精氨酸和氧在一氧化氮合酶(Nitxic oxide synthase,NOS)的作用下生成一氧化氮和瓜氨酸。还原型辅酶Ⅱ(NADPH)是一氧化氮合酶的辅酶,可将底物脱氢,然后将氢传递给硝基四氮唑蓝(NBT),NBT会被还原成蓝黑色沉淀,该沉淀部位即为NADPH所在部位即NOS部位。
一氧化氮合酶染色液由磷酸盐缓冲、漂洗、孵育、复染等步骤,可用于组织冰冻切片染色,尤其适用于脑组织冰冻切片染色,亦可用于细胞爬片、细胞涂片染色。该染色液仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。
自备材料:
1、 30%蔗糖
2、 4%多聚甲醛
3、 湿盒、恒温箱、显微镜
注意事项:
应选择恰当的固定液、固定方法、固定时间,否则会影响酶的活性。
中性红复染可以更好的显示细胞轮廓,有助于进一步计数阳性细胞率。
组织切片染色时,可见NOS神经元,类似于Golgi银染,胞体、神经纤维、纤维末梢均可着色。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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