糖原染色是病理学中常规的染色方法之一,McManus在1946年最先使用高碘酸-雪夫技术显示黏蛋白,该法常用来显示糖原和其他多糖。该技术不仅能够显示糖原,还能显示中性黏液性物质和某些酸性物质,以及软骨、垂体、霉菌、真菌、色素、淀粉样物质、基底膜等。过碘酸(又称高碘酸)一种强氧化剂,它能氧化糖类及有关物质中的1,2-乙二醇基,使之变为二醛,醛与Schiff试剂能结合成一种品红化合物,产生紫红色。由于高碘酸还可氧化细胞内其他物质,使用时应注意选择好高碘酸浓度和氧化时间,使氧化控制在即能把乙二醇基氧化成醛基,又不至于过氧化,这是很关键的步骤。过碘酸溶液(0.5%)适用于较薄的组织切片,尤其适用于氧化培养细胞。
操作步骤(仅供参考):
1、常规固定,常采用10%的福尔马林,常规脱水包埋。
2、石蜡切片脱蜡入蒸馏水;冰冻切片直接入蒸馏水。
余下步骤按实验具体要求进行。
注意事项:
1、 切片脱蜡应尽量干净,否则影响染色效果。冷冻切片染色时间尽量要短。
2、 过碘酸氧化时间不宜过久,氧化时的温度以18~22℃最佳。
3、 应置于4℃密闭保存,使用时避免接触过多的阳光和空气。使用前,最好提前30min取出恢复到在室温后,避光暗处使用。
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