淀粉样物质是一种无固定形状的细胞外嗜酸性物质,可存在于不同的组织、器官导致的疾病称为淀粉样变。淀粉样物质主要是由蛋白质构成,该蛋白大部分排列成反向的β-折叠层结构。在电子显微镜下,淀粉样物质呈原纤维排列,病例材料中为大量细胞外的、不分支的细丝,大多随机排列。用于识别淀粉样物质的组织学方法有甲紫染色、刚果红染色、偏振光显微镜观察等。目前研究发现传统的甲紫染色法灵敏度低、特异性差,经典的而且有效的方法是刚果红染色,1922年Bennhold发现了刚果红可以用于活体内淀粉样物质的鉴别,并应用到组织切片,后来经过Highman改良,染色效果更好。
淀粉样物质染色液(改良Stores刚果红法),主要由Stores刚果红染色液和苏木素染色液组成,碱性刚果红染色无分化步骤,但保存时间较短。
自备材料:
1、10%中性福尔马林固定液
2、蒸馏水
3、系列乙醇
操作步骤(仅供参考):
1、常规固定,常采用10%的中性福尔马林,常规脱水包埋。
2、切片厚度4μm,常规脱蜡至水。
3、入Stores刚果红染色液浸染25~30min,弃余液。
5、无需分化,自来水冲洗5min。
6、入苏木素染色液,浅染细胞核1~2min或更短时间。
注意事项:
1、 切片脱蜡应尽量干净,否则影响染色效果。
2、 酸性乙醇分化液应密闭保存,一旦开启尽快用完。
3、 Stores刚果红染色液染色时尽量采用浸染,如果滴染,应置于湿盒防止溶液挥发。
4、 酸性分化液应密闭保存,分化步骤很重要。
5、 脱水应迅速,避免脱色。
6、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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