在染色技术中,大多数情况下胆色素是指所有以相同反应方式的所有类型胆色素的总成,这包括结合胆红素、非结合胆红素、胆绿素、类胆红素等。这些物质的化学结构各异,物理性质各异,特别是其在水和乙醇中溶解性差异较大。大多数肝组织切片在显微镜下都是胆绿素、结合胆红素、非结合胆红素的混合物。多见于胆管阻塞、胆红素代谢异常、肝细胞坏死或退化等。在肝组织学检查中,鉴别胆色素与脂褐素很重要,普通HE染色中二者都呈黄褐色,不易区分。
胆色素染色试剂盒采用改良Fouchet法,利用铁的氧化作用使胆绿素呈绿色,纤维呈染色后黑色素呈黑色,该法属于常用的黑色素特殊染色法,效果较其他染色理想。
自备材料:
1、 10%中性福尔马林固定液
2、 蒸馏水
操作步骤(仅供参考):
1、 固定: 10%中性福尔马林或10%中性福尔马林是最好的固定液,其他固定液亦可。
2、 切片厚度5mm,将实验切片及对照切片入蒸馏水。
3、 入Fouchet染色液,避光浸染5~10min。
4、 流水冲洗后,蒸馏水稍洗。
5、 入VG染色液浸染或滴染1~2min。
6、 流水快速冲洗一下,立即95%乙醇快速分化。
7、 无水乙醇脱水,二甲苯透明、中性树胶封固。
注意事项:
Fouchet染色液最好即配即用,配置后可4℃保存3-4周。。
如要复染细胞核,可用苏木素染色液,但出现的胆色素颜色呈暗绿色。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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