人体内嘌呤(核苷酸)代谢的分解产物是尿酸盐。大多数尿酸并非全部经由肾脏排除,有时以尿酸钠的形式存在于血液循环中。在痛风患者血液中尿酸钠含量较高,过高的尿酸钠易出现尿酸盐沉积,从而导致痛风石、滑膜炎、关节炎、肾结石等。大多数尿酸盐镜下可见针状结晶体互相平行排列。
采用Gomori六胺银法对尿酸盐染色,使尿酸盐结晶呈黑色,常用于辅助诊断尿酸盐所致的通风结节。由于尿酸盐易溶于水,而不易溶于乙醇,故固定时,应采用乙醇而不是福尔马林等固定液。
自备材料:
1、无水乙醇
2、蒸馏水
3、恒温箱
操作步骤(仅供参考):
1、组织固定:固定于无水乙醇16h或过夜。再经无水乙醇浸泡3次,每次30min。
2、经二甲苯浸泡2次,每次20min,常规浸蜡包埋。
3、切片厚度5μm,二甲苯脱蜡至无水乙醇。
4、提前配制好Gomori六胺银溶液,并提前预热至58~60℃。切片浸入预热的Gomori六胺银溶液(加盖),并置于58~60℃恒温箱孵育30min。如有尿酸盐存在,切片呈黑色。
5、蒸馏水稍洗。
6、浸入氯化金溶液处理1min。
7、自来水稍洗。
8、入海波溶液处理5min。
9、自来水冲洗5min。
10、伊红染色液淡染30s。
11、自来水稍洗。
12、常规脱水透明,中性树胶封固。
阴性对照:
取连续切片脱蜡后,先经Gomori对照孵育5min,用无水乙醇侵洗2次,入Gomori六胺银溶液。其余步骤同前,钙盐呈阴性。
注意事项:
1、 尿酸盐易溶于水,组织固定必须用无水乙醇,切片入Gomori六胺银溶液前避免切片与水接触。
2、 如果用水浴锅代替恒温箱,温度应适当调节至48~50℃,否则切片易变黑。
3、 组织内如果含有钙盐,易出现假阳性,应注意与针状的尿酸盐区分。
4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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