髓鞘(Myelin Sheath)是包裹在神经细胞轴突外面的一层膜,即髓鞘由髓鞘细胞和细胞膜组成,是神经膜细胞的质膜沿着轴索的轴心螺旋缠绕形成的多层脂双层结构, 髓鞘上有郎飞氏结,可使神经冲动跳跃传递。髓鞘染色在病理诊断中有一定意义,髓鞘的病理变化分为早期、中期和晚期。在早期着色较深;病变中期阶段的髓鞘变性形成脂滴,可用脂质染色加以显示,后期彻底溃变并被吞噬细胞清除,故不再有髓鞘的阳性结果。
很多疾病都可以引起髓鞘的变化,髓鞘染色液(固绿法可以显示病理情况下髓鞘是否完整、变性、坏死程度及修复情况,对神经组织的病理诊断和研究均有意义, 髓鞘呈深蓝色,脱髓鞘纤维不着色。
自备材料:
1、 蒸馏水
2、 系列乙醇
3、 恒温箱
操作步骤(仅供参考):
固定:采用甲醛钙固定液固定样本。
石蜡切片脱蜡至蒸馏水。
切片入95%乙醇稍洗1min。
入固绿染色液,37℃恒温箱染色30~45min。
直接用95%乙醇洗涤2次,每次10s。
蒸馏水冲洗。
入MS分化液分色10s。
蒸馏水冲洗 (如果分色不足,可重复6步骤)。
常规梯度乙醇脱水,二甲苯透明,中性树胶封固。
注意事项:
分化这一步很关键,应严格控制分化时间,可在镜下观察分化程度。
固定液以10%的甲醛钙固定液为佳。
切片不宜太厚,应控制在5~7μm以内,否则易出现脱片或过染等现象。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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