磷脂(Phospholipid)是指含有磷酸的脂类,属于复合脂。磷脂是生物膜的成分,分为甘油磷脂和鞘磷脂两类。磷脂为两性分子,一端为亲水的含氮或磷的头,另一端为疏水(亲油)的长烃基链。Elleder发现磷脂可通过三价铁苏木素显示出来,该法比DAH更简便、快速、敏感。其缺点是只有组织用丙酮脱脂后染色效果才好,而且有时细胞核和脂质会被同时染色呈黑蓝色。
自备材料:
1、 氯仿
2、 丙酮
3、蒸馏水
操作步骤(仅供参考):
1、 室温下用氯仿:甲醇溶液(1:1)浸泡1张切片1h作为对照,4℃条件下用无水丙酮浸泡另外1张切片15min。
2、 入FeH 固定液固定30min。
3、 蒸馏水冲洗。
4、 提前配制FeH stain:每取5ml苏木素溶剂,加入一支FeH 苏木素0.1g。充分溶解后,加入25ml FeH buffer,即为FeH stain。
5、 入FeH stain染色7~10min。
6、 蒸馏水冲洗。
7、 用蒸馏水等量稀释FeH 分化液后,切片入稀释后的FeH分化液浸泡数次。
8、 自来水冲洗。
9、 丙酮脱水,二甲苯透明,DPX封片剂封固。
注意事项:
1、 磷脂容易溶解,所以组织取出后应立即固定,否则难以着色。
2、 本染色液对冰冻切片的染色效果较好。
3、 染色后的标本务必避光保存,否则容易褪色。
4、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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