姬姆萨色素(又称吉姆萨色素)是由天青Ⅱ与伊红混合而成,Giemsa染色原理和结果与瑞氏染色基本相同,姬姆萨染色液对胞浆着色力较强,能较好的显示胞浆的嗜碱性程度,特别是对血液和骨髓细胞中的嗜天青、嗜酸性、嗜碱性颗粒,着色清晰,但是对胞核着色偏深,核结构显色不佳,故姬姆萨染液常与瑞氏染液联合使用。 Giemsa Stain以进口的姬姆萨色素、甲醇为主要原料,含特有衬染剂,经研磨配制而成,能呈现出清晰的细胞染色效果。经常用于组织切片、血液和细胞涂片、细菌、染色体显带、原生动物寄生虫等染色。嗜酸性颗粒为碱性蛋白质,与酸性染料伊红结合,染粉红色,称为嗜酸性物质;细胞核蛋白和淋巴细胞胞浆为酸性,与碱性染料美蓝或天青结合,染紫蓝色,称为嗜碱性物质;中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合,染淡紫色,称为中性物质。
自备材料:
甲醇、乙醇
蒸馏水
(可选)0.1%~0.5%乙酸
显微镜
操作步骤(仅供参考):
(一)涂片染色
常规方法制备血液涂片或骨髓涂片,待涂片自然干燥后,用甲醇固定2~3min。
将血液涂片或骨髓涂片放置染色架上,滴加Giemsa Stain(即用型)覆盖涂片,室温或加热染色10~15min。
用自来水或蒸馏水从玻片一端缓慢的轻轻冲洗。
(可选)0.1%乙酸分化数秒。
(二)组织切片染色
1、常规固定组织,常规脱水包埋。
2、切片5μm,常规脱蜡至水。
3、蒸馏水清洗2次,每次1~2min。
4、入Giemsa Stain(即用型),浸染12~24h。蒸馏水稍清洗。
5、0.5%乙酸清洗1~2min。自来水稍微冲洗。
6、无水乙醇迅速脱水3次,每次5~10s。
7、二甲苯透明,中性树脂封固。
注意事项:
血液涂片或骨髓涂片应厚薄均匀,否则影响染色效果。
涂片染色中Giemsa染色后,请勿先去除染液或直接对涂片用力冲洗。
如果染色过深或过浅,应调整染色时间或染色液的浓度。
Giemsa涂片染色和组织切片染色中,pH值对染色有一定影响,载玻片应清洁、无酸碱污染,否则影响染色效果。
染色液经稀释后液面应金属光泽则表示染液有染色作用,否则染色液可能失效。
Giemsa组织切片染色中,染色后需用大量0.1~0.5%乙酸急速冲洗,避免浮面沉淀物污染切片后难以洗脱。
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