芽孢又称芽胞是特殊性质的细菌,是某些细菌在其生长发育后期,在细胞内形成的一个圆形或椭圆形的厚壁的含水量低的休眠体构造。芽孢对热、碱、酸及辐射有很强的耐受性。普通消毒法(如巴斯德消毒)无法杀灭芽孢,须经高压灭菌方可杀灭芽胞。细菌芽胞的大小、形态和位置鉴定,对鉴别细菌有重大意义。
芽孢染色原理在于芽胞折光性很强,用着色力强的石碳酸复红,在加热条件下染色,使染料不仅进入菌体也可进入芽胞内,进入菌体的染料经脱色液被脱色,而芽胞一经着色后则难以被脱色液脱掉,再经碱性美蓝液复染,芽胞仍保留红色,而菌体被染成蓝色,使芽胞和菌体更易于区分。该试剂比较稳定,操作简单,结果判断可靠。
自备材料:
1、 载玻片、盖玻片
2、 显微镜
操作步骤(仅供参考):
1、 常规涂片。
2、 滴加石碳酸复红染色液于涂片上,缓缓加热使染液冒蒸汽但不沸腾,并继续滴加热液不使涂片上的染液蒸干,这样维持5min。
3、 待涂片自然冷却至室温,倾去染液。用脱色液脱色至无红色染液流出为止,水洗。
4、 滴加碱性美蓝染色液,复染2~3min。
5、 轻轻水洗。
6、 用滤纸沿涂片边缘吸干水分,镜检。
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