多聚赖氨酸溶液英文名为Poly-L-lysine Solution简称PLL。Leagene Poly-L-lysine为Poly-L-lysine hydrobromide,分子式为L-Lys-(L-Lys)n-L-Lys•xHBr,分子量为150,000~300,000,CAS Number 25988-63-0。
PLL是一种粘附剂,常用于载玻片的包被,可以直接稀释后用于细胞或组织培养方面的实验。分子量大于70,000的多聚赖氨酸可以促进细胞贴壁生长,本产品可以用于促进细胞的贴壁生长和核酸杂交,制备好的载玻片可4℃保存半年。
操作步骤:
用于细胞培养
① 根据实验需要Poly-L-lysine Solution稀释至适当浓度溶液后即可使用。不同的细胞,Poly-L-lysine Solution包被(Coating)的时间和浓度,甚至稀释液的选择有所不同,请自行参考相关文献进行适当的包被。
②Poly-L-lysine Solution用于细胞培养时,包被至少5min,有些实验需要包被1~2h,有些情况则需要包被过夜。
③包被完成后,吸Poly-L-lysine Solution,干燥培养器皿,至肉眼观察完全干燥。通风橱内吹风数分钟即可完成干燥,对于有些实验则需要干燥2h或更长时间。干燥时间较长通常会更加有利于后续的细胞粘附。
④进行细胞培养,也可以用水、PBS或培养液等适当溶液润洗后再进行细胞培养。
用于核酸杂交
① 方法一:取事先准备好的载玻片或盖玻片经160℃冷却至室温,在Poly-L-lysine Solution上下浸蘸几下,自然干燥,4℃备用,亦可室温保存1个月。
② 方法二:Poly-L-lysine Solution涂于玻片上,自然干燥后即可使用,可用于细胞涂片和切片。
③ 方法三:滴加5~10μl Poly-L-lysine Solution至玻片上,用另一盖玻片以血涂片方法推片或用另一玻片紧贴于其上,相互摩擦以使两玻片相对的一面涂布上明胶包被溶液。
注意事项:
Poly-L-lysine可以被某些细胞所消化并吸收,摄入过多的Poly-L-lysine会产生一定的细胞毒性。
避免反复冻融,如果大量使用,可以取适量溶液置于4℃保存,6个月有效。
浸蘸Poly-L-lysine Solution时,务必使玻片完全浸入液体中,否则易使包被不完全产生样本脱落现象。
干燥过程中注意避免尘埃污染。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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