胃幽门螺杆菌(Helicobacter Pyloric,HP)又称胃幽门弯曲菌(Campylobacter Pyloric)。现已证实这种细菌与慢性胃炎和消化性溃疡有密切关系。胃幽门螺杆菌一般呈弧形、S形或海鸥状,有时可见3~4个弯曲呈螺旋状,常呈鱼群状分布。该菌多见于胃黏膜表面上皮与黏膜层之间,并贴近表面上皮细胞,部分进入上皮细胞胞质内,胃小凹和黏膜浅层腺腔内亦有此菌。幽门螺旋杆菌染色主要有亚甲蓝法、硝酸银法、迈格林华-姬姆萨法(May-Grunwald-Giemsa,MGG法)、碱性品红法等。硝酸银法对比清楚,染片可以长期保存,但操作较为麻烦、耗时。其他方法较为简便,但染片容易褪色。
May-Grunwald-Giemsa染色液主要由迈格林华染液和姬姆萨染液组成,染色后胃幽门螺旋杆菌呈蓝色,胶原纤维呈红色,红细胞呈绿色,胃黏膜上皮呈淡蓝色,细胞核呈深蓝色。HP多位于胃黏膜上皮表面的黏液中,特别在胃小凹中数量较多。
自备材料:
1、10%福尔马林固定液
2、蒸馏水
3、系列乙醇
操作步骤(仅供参考):
1、 组织固定于10%福尔马林,常规脱水包埋。
2、 切片厚4µm,常规脱蜡至水。
3、 再用蒸馏水洗1次。
4、 把切片周围水分抹干,滴入May-Grunwald工作液数滴染色10min,倾去染液。
5、 Giemsa工作液滴染20min,倾去染液。
6、 无水乙醇快速洗去余液,稍烤干。
7、 二甲苯透明,中性树胶封固。
注意事项:
1、 幽门螺旋杆菌染色液(MGG法)中May-Grunwald工作液和Giemsa工作液须于临用前配置,不宜保存。
2、 最后的无水乙醇要速洗,否则容易脱色。
3、 胃幽门螺旋杆菌仅用Giemsa工作液染色也可以显示出来,也较清晰。
4、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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