结晶紫(Crystal violet)又称甲紫,分子式为C25H30N3Cl·9H2O,分子量为407.98,CAS号为548-62-9。结晶紫属于碱性染料,能溶于水、乙醇,可以把组织和细胞核染成紫色。结晶紫在细胞学、组织学和细菌学等方面应用极广,是一种优良的染色剂。
操作步骤(仅供参考):
1、样品处理
①对于石蜡切片:
二甲苯中脱蜡5~10min。
换用新鲜的二甲苯,再脱蜡5~10min。
无水乙醇5min。
90%乙醇2min。
70%乙醇2min。
蒸馏水2min。
②对于冰冻切片:
蒸馏水2min。
③对于培养细胞:
用4%多聚甲醛固定10min以上。(或采用如下步骤:每25cm2加入PBS/甲醇溶液5ml,静置2min,弃液。加入新鲜甲醇5ml,静置10min,弃液。)
蒸馏水洗涤2分钟。
更换新鲜的蒸馏水,再洗涤2min。
2、结晶紫染色
①结晶紫染色液染色10min(可以根据染色结果和要求调整时间)。
②用蒸馏水或自来水充分洗涤,进行观察和拍照。
注意事项:
结晶紫对人体有害,请注意适当防护。
第一次使用本试剂时建议先取1~2个样品做预实验。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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