亚甲基蓝(Methylene blue)又称美蓝、次甲基蓝、次甲蓝等,含水亚甲基蓝的分子式为C16H24ClN3O3S,分子量为373.9,CAS号为7220-79-3。
亚甲基蓝染色液常用于丝绸、纸张、细菌、细胞等染色。因其容易氧化,染色结果不宜长久保存。
操作步骤(仅供参考):
1、样品处理
①对于石蜡切片:
二甲苯中脱蜡5~10min。
更换新鲜的二甲苯,再脱蜡5~10min。
无水乙醇5min。
90%乙醇2min。
70%乙醇2min。
蒸馏水2min。
②对于冰冻切片:
蒸馏水2min。
③对于培养细胞:
用4%多聚甲醛固定10min以上。(或采用如下步骤:每25cm2加入PBS/甲醇溶液5ml, 静置2min,弃液。加入新鲜甲醇5ml,静置10min,弃液。)
蒸馏水洗涤2min。
换用新鲜的蒸馏水,再洗涤2min。
2、美蓝染色
①Methylene blue Stain(0.5%)染色3~10min(可以根据染色结果和要求调整时间)。
②用蒸馏水或自来水充分洗涤,进行观察和拍照。
注意事项:
第一次使用本试剂时建议先取1~2个样品做预实验。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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