固定的目的在于保存细胞和组织的原有形态结构,固定剂能阻止内源性溶酶体酶对自身组织和细胞的自溶、抑制细菌和霉菌的生长。固定剂通过凝固、生成添加化合物等使蛋白质内部结构发生改变,从而使酶失活。固定液分为醛类固定液、汞类固定液、醇类固定液、氧化剂类固定液、苦味酸盐类固定液等,较为常用的是醛类中的福尔马林、醇类中的乙醇。
BS固定液(BS fixing solution)主要由甲醇、乙酸等混合而成,固定后对于细胞核染色固定,尤其适用于细胞核DNA染色的固定。
操作步骤:
1、 按实验具体要求操作。
2、 血涂片或细胞涂片置于提前预热至30~40℃的BS fixing solution,固定20~30min。
3、 进行下游染色实验。
注意事项:
组织取材的厚度不同,固定时间也不同,对组织恰当的选材有利于固定液的渗透。
固定液的容量应足够,一般固定液与组织块的体积比率应大于10:1。
取出新鲜组织后,应及时固定,无法及时固定时,应保存于生理盐水中及时送检。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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