固定的目的在于保存细胞和组织的原有形态结构,固定剂能阻止内源性溶酶体酶对自身组织和细胞的自溶、抑制细菌和霉菌的生长。固定剂通过凝固、生成添加化合物等使蛋白质内部结构发生改变,从而使酶失活。固定剂对细胞核细胞外成分发生物理改变。固定液主要分为醛类固定液、汞类固定液、醇类固定液、氧化剂类固定液、苦味酸盐类固定液等,较为常用的是醛类中的福尔马林、醇类中的乙醇。
中性福尔马林固定液(10%)主要由甲醛、磷酸盐、去离子水组成,pH为7.2~7.4,该固定液适合于绝大多数组织的固定。
操作步骤:
1、 按实验具体要求操作。一般标本固定时间控制在1~4h/mm,大标本应适当延长固定时间。
2、 固定好的组织,可在中性福尔马林固定液(10%)或70%乙醇中长期保存。
注意事项:
中性福尔马林固定液(10%)有一定刺激性和腐蚀性,请在通风较好的环境下小心操作, 避免吸入。
组织取材的厚度不同,固定时间也不同。常规活检组织比较适合的厚度为2~4mm,一般不超过6mm。对组织恰当的选材有利于固定液的渗透。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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