固定的目的在于保存细胞和组织的原有形态结构,固定剂能阻止内源性溶酶体酶对自固定的目的在于保存细胞和组织的原有形态结构,固定剂能阻止内源性溶酶体酶对自身组织和细胞的自溶、抑制细菌和霉菌的生长。固定剂通过凝固、生成添加化合物等使蛋白质内部结构发生改变,从而使酶失活。固定剂对细胞核细胞外成分发生物理改变。固定液主要分为醛类固定液、汞类固定液、醇类固定液、氧化剂类固定液、苦味酸盐类固定液等,较为常用的是醛类中的福尔马林、醇类中的乙醇。戊二醛固定液会引起蛋白质α-螺旋结构变形,不利于过氧化物酶染色,速速度快,渗透力差。
戊二醛固定液(4%)主要由戊二醛、磷酸盐等组成,pH7.2~7.4,该固定液对细胞核、细胞浆的细微结构固定效果好,是最常用的标准戊二醛固定液,经常用于电镜标本的固定。
操作步骤:
1、取新鲜标本,立即入戊二醛固定液(2%)中,4℃固定1~4h,稍大标本应适当延长固定时间。
2、送检或4℃保存。
注意事项:
戊二醛固定液(4%)有一定腐蚀性,请在通风较好的环境下小心操作, 避免吸入。
组织取材的厚度不同,固定时间也不同。常规活检组织比较适合的厚度为2~4mm,一般不超过6mm。对组织恰当的选材有利于固定液的渗透。
温度对固定的影响很明显,提高温度可以加速固定作用,但本固定液最好不要提高温度。
取出新鲜组织后,应及时固定。无法及时固定时,应保存于生理盐水中及时送检。
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