在免疫组化染色中,如果组织内存在相同的内源酶,应抑制内源性酶活性,不能让其加入底物的反应体系,以免影响标记的效果。过氧化物酶反应的最佳pH值是5,但pH=5.0时反应产物常常比较粗糙,因此在免疫组化染色中常使用pH6.0~7.6以延缓反应,使反应产物颗粒变小。在免疫组化染色前需要抑制内源性过氧化物酶的活性,以便去除非特异性结合反应。
过氧化物酶封闭液(H2O2法)由低浓度H2O2、磷酸盐等组成,能够很好的非特异性结合反应,尤其适用于封闭内源性过氧化物酶的活性。
操作步骤:
1、 切片贴于玻片上,用PBS轻轻清洗。
2、 将玻片吸干或吹干,入过氧化物酶封闭液(H2O2法),孵育10~20min。
3、 无需清洗,直接将玻片吸干或吹干。
4、 在未标记的一抗中孵育。
注意事项:
1、 一经开启,立即使用,防止有效成分挥发。
2、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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