组织在制作过程中由于化学试剂的作用封闭了抗原,又由于热作用致使部分抗原的肽链发生扭曲,致使在免疫组化的染色过程中不能将其显示出来,为了解决上述的问题,利用化学试剂和热作用将这些抗原重新暴露出来或修正过来的过程称为抗原修复。柠檬酸盐、EDTA、Tris等缓冲液在热的条件下可以使被福尔马林固定液屏蔽的抗原重新暴露出来,同时又不会对抗原表位造成破坏,从而提高抗原的检出率,降低背景染色,提高诊断的准确率。 抗原修复有多种方法,主要方法可简要归纳为加热修复和非加热抗原修复两大类。非加热抗原修复方法包括酶消化、真空负压、酸水解等方法。
操作步骤:
切片脱蜡至水。
切片入H2O2甲醇溶液处理切片10min。
自来水洗,蒸馏水洗。
PBS洗3次,每次1min。
滴加或将玻片浸入微波抗原修复液,微波炉内750W辐射10min。
修复液恢复至室温后,PBS洗3次,每次2min。
按选好的免疫组化染色方法进行染色。
注意事项:
由于组织固定方法和时间长短与强度不同,抗原修复所需的消化时间会有很大差异,实验人员应依据免疫染色的结果相应的调整,确定最佳消化时间。
本品不含防腐剂,一经开启不宜4℃长期保存。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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